2．试验设计与材料

2.1  试验内容与方案

硒具有很强的抗氧化清除自由基的作用，这已有大量研究证实，并已被公认，而其抑菌作用少有报导，效果如何需要试验证实；加工食品可直接加入其中，非加工食物采用什么措施使其发挥作用？使用一种载体与之复合成膜粘附在食物表面是较好的途径，既可减少与氧气的接触又可很好地发挥出硒的作用。根据这一思路，我拟定了如下试验方案：

2.2  试验材料与方法

菌种：湖南农业大学生化与发酵工程实验室提供；

原料：魔芋精粉由湖北省恩施市宏业魔芋有限责任公司提供；

试剂：亚硒酸钠(化学纯) 上海三浦化工有限公司，氢氧化钠(化学纯)。

细菌培养液：牛肉膏 0.5 g，蛋白胨 1 g，NaCl 0.5 g，水 100ml。

细菌培养基（肉膏蛋白胨培养基）：牛肉膏 5 g，蛋白胨 1 g，NaCl 0.5 g，琼脂 1.5～2 g，水 100ml，pH 7.2。

肉汤培养基：牛肉膏 0.3 g，蛋白胨 1 g，NaCl 0.5 g，琼脂 3.5 g，水 100ml，pH 7.6。

霉菌培养基（察氏培养基）：蔗糖 3 g，硝酸钠 0.3 g，磷酸氢二钾 0.1 g，氯化钾 0.05 g，硫酸镁 0.05 g，硫酸亚铁 0.001 g，琼脂 1.5～2 g，水 100 ml，pH 6.7。

仪器与设备：恒温培养箱（SHH.WH Cr-600），水浴锅，手动封口机（G-B₂），分析天平，超净工作台，高压灭菌锅等。

活细菌总数的测定方法：将制备的肉汤培养基装在250毫升三角瓶中。洗净6个培养皿，分别标记等稀释度，每个稀释度两个，包扎好。取6支试管，分别加9 ml蒸馏水，包扎好，标上等字样。取7支移液管，洗净，嘴端塞上棉花，每支分别包扎好。上述器具一起在121℃，0.105MPa下灭菌20 min。取1 ml没有产气的细菌培养液放入10^-1试管中，依次进行稀释至10^-4，10^-5，10^-6。取已灭菌的培养皿6个，标记10^-4，10^-5，10^-6各两套，分别用10^-4，10^-5，10^-6无菌吸管吸取10^-4，10^-5，10^-6稀释菌液0.1 ml放入相应的无菌培养皿中。在上述装有不同稀释度的稀释液的培养皿中，分别倒入冷至45℃左右的肉汤培养基，每个稀释度各倒两个，迅速旋转均匀，在37℃的培养箱中培养72h。取出培养皿，算出可记数的同一稀释度两个皿上的菌落平均数，按下式计算：

活菌数＝平均数×稀释度。

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